難溶肽純化技術(shù)
在我們多肽生產(chǎn)純化過程中，經(jīng)常會遇到難溶的序列，這導(dǎo)致了眾多多肽公司多肽成產(chǎn)過程中收率低，難純化，成品純度不合格甚至多肽生產(chǎn)失敗等后果，這種難溶性與多肽自身的氨基酸組成及序列有密切關(guān)系，我們在多肽領(lǐng)域內(nèi)長期深入的研究，讓我們積累了大量的寶貴經(jīng)驗，保證我對于難溶肽的溶解純化保持很高的成功率和產(chǎn)品質(zhì)量。
我們對于難溶肽的溶解總結(jié)出以下幾點：
通常整體顯酸性的多肽溶解困難時可以加入適量的堿性溶液，而顯堿性的多肽溶解困難時可以加入適量的酸性溶液;。
序列中含有大量疏水性氨基酸或中性氨基酸時，難于直接溶于水，通常需要先加入少量有機溶劑，溶解完全后用蒸餾水大量稀釋，常用的有機溶劑有乙腈，DMSO，DMF，丙醇，異丙醇等;
當(dāng)肽鏈中含有Met或者Cys時，不能用DMSO溶解，因為DMSO有氧化性，這很可能會導(dǎo)致肽鏈中含有的S被氧化;
專肽專柱：我們在開發(fā)Amyloid系列產(chǎn)品的過程中，發(fā)現(xiàn)用DMOS溶解的產(chǎn)品純化后使用的純化柱基本就不能用于其他產(chǎn)品的純化，為了保證Amyloid產(chǎn)品的穩(wěn)定，我們對于Amyloid等類似產(chǎn)品都配用了專門的純化柱。
在不影響您實驗需求的情況下，也可以針對肽鏈的物理性質(zhì)，化學(xué)性質(zhì)和分子結(jié)構(gòu)，對多肽進行修飾改變，增加其溶解性，以下是我們的建議：
修飾肽鏈中C端和N端：對于酸性肽，我們推薦C端乙酰化修飾;對于堿性肽，我們推薦N端氨基化修飾;
修改肽鏈中的氨基酸序列：某些序列存在大量的連續(xù)的疏水性氨基酸，例如W, F, V,I, L, M, Y ,這些疏水氨基酸在序列中大量或者連續(xù)重復(fù)出現(xiàn)時，整條肽鏈通常是難溶的，為了增強肽的極性和親水性，我們建議客戶在不影響實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，延長序列，或者通過減少疏水性氨基酸的個數(shù)來增加溶解性。
替換序列中疏水性氨基酸的殘基：在不影響實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，用可溶性的氨基酸替代序列中的疏水性氨基酸可以達到增加溶解度的效果。我們通常用Gly, Ala來替換疏水性氨基酸，一般都會取得比較好的溶解效果，這也是一種保守但有效的增強多肽溶解度的方法。
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